ОСОБЕННОСТИ ПРОЛИФЕРАТИВНЫХ ПРОЦЕССОВ В КЛЕТОЧНЫХ КУЛЬТУРАХ ИЗ ОБРАЗЦОВ ЛЮМИНАЛЬНОГО В (HER2-НЕГАТИВНОГО) ПОДТИПА РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ
УДК: 616-006.699
DOI: 10.22138/2500-0918-2023-20-1-53-62
Е.В. Гребенюк¹, А.С. Могиленских², С.В. Сазонов¹,²
¹ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего
образования Уральский государственный медицинский университет Министерства
здравоохранения Российской Федерации, г. Екатеринбург, Российская Федерация;
² Государственное автономное учреждение здравоохранения Свердловской области «Центр специализированных видов медицинской помощи «Институт медицинских
клеточных технологий», г. Екатеринбург, Российская Федерация
Резюме. Введение. Маркер клеточной пролиферации Кi-67 – необходимое условие современной морфологической диагностики рака молочной железы, его связь со степенью злокачественности и риском развития рецидива заболевания доказана. Однако динамика индекса Ki-67 в клеточной культуре из опухолей исследуемого подтипа изучена недостаточно. Цель. Оценить уровни экспрессии Ki-67 в клеточных культурах из образцов опухолей Люминального B (HER2-негативного) биологического подтипа. Материалы и методы. Опухолевые клетки были выделены из образцов рака молочной железы ферментативным способом по стандартному протоколу получения клеточной культуры. На каждом из пяти пассажей часть клеток высеивали на стекла в чашки Петри для иммуноцитохимического анализа. Окрашивание проводилось в автостейнере Ventana (США) с применением антител anti-Pan Keratin (AE1/AE3/PCK26) Primary Antibody (Roche diagnostics, США) и Ki-67 (клон MIB-1, Dako, Дания). Результаты и обсуждение. На основании иммуногистохимических исследований парафиновых блоков образцы были отнесены к Люминальному B (Her2-негативному) подтипу. Выделены культуры и определена экспрессия Ki-67 в опухолевых клетках на всех пяти пассажах. Выявлены достоверные различия в значениях индекса пролиферации между исследуемыми пассажами. Сохранена эпителиальная природа клетками опухоли, что подтверждено данными иммуноцитохимического окрашивания на панцитокератин. Наибольшие значения пролиферативной активности определены на первом и третьем пассажах. Индекс Ki-67 в клетках культуры соответствовал его значениям в опухолевой ткани первичных образцов Люминального B (HER2-негативного) подтипа на втором, третьем и четвертом пассажах. Заключение. Высокий уровень пролиферативных процессов в популяции клеток, сохраняющих эпителиальный фенотип при культивировании позволяет использовать клеточные культуры как сравнительную модель для анализа экспрессии молекулярно-биологических маркеров и их соответствия данным ИГХ показателей первичной опухоли.
Ключевые слова: рак молочной железы, первичная клеточная культура, Люминальный B (HER2-негативный) подтип, иммуноцитохимия
Конфликт интересов отсутствует.
Контактная информация автора, ответственного за переписку:
Гребенюк Екатерина Владимировна
ev.grebenyuk9@yandex.ru
Дата поступления: 13.04.2023
Образец цитирования:
Гребенюк Е.В., Могиленских А.С., Сазонов С.В. Особенности пролиферативных процессов в клеточных культурах из образцов люминального B(HER2-негативного) подтипа рака молочной железы. [Электронный ресурс] Вестник уральской медицинской академической науки. 2023, Том 20, № 1-2, с. 53–62, DOI: 10.22138/2500-0918-2023-20-1-53-62
ЛИТЕРАТУРА
1. Neve R.M.; A collection of breast cancer cell lines for the study of functionally distinct cancer subtypes; Cancer Cell; 2006; 10 (6): 515-527.
2. Freshney R.I.; Induction of differentiation in neoplastic cells; Anticancer Res; 1985; 5(1): 111-130.
3. Сазонов С.В.; Обеспечение качества молекулярно-биологических исследования при диагностике рака молочной железы: Екатеринбург: ВУМАН; 2018.
4. Perou Ch.M., Sorlie T., Eisen M.B. Rijn M., Jeffrey S.S., Rees C.A. et al.; Molecular portraits of human breast tumours; Nature; 2000; 406 (6797):747–52.
5. Prat A., Perou Ch.M.; Deconstructing the molecular portraits of breast cancer; Mol. Oncol; 2011; 5 (1): 5–23.
6. Rivenbark A.G., O’Connor S.M., Coleman W.B.; Molecular and cellular heterogeneity in breast cancer: challenges for personalized medicine; Am. J. Pathol.; 2013; 183 (4):1113–24.
7. Marusyk A., Almendro V., Polyak K.; Intra-tumour heterogeneity: a looking glass for cancer?; Nat. Rev. Cancer; 2012; 12 (5): 323–34.
8. Брагина О.Д., Слонимская Е.М., Завьялова М.В., Телегина Н.С., Перельмутер В.М., Тарабановская Н.А. и др.; Предсказательное значение ряда молекулярных параметров у больных базальноподобным трипл-негативным раком молочной железы; Сибирский онкологический журнал; 2014; (3): 5-10.
9. Assersohn L., Salter J., Powles T.J., A’hern R., Makris A., Gregory R. K. et al.; Studies of the potential utility of Ki67 as a predictive molecular marker of clinical response in primary breast cancer; Breast Cancer Res Treat; 2003; 82 (2): 113–123.
10. Сазонов С.В. ИГХ диагностика рака молочной железы: Saarbrücken: LAP LAMBERT Acad. Publ.; 2013.
11. Sasaki K., Matsumura K., Tsuji T., Shinozaki F., Takahashi M.; Relationship between labeling indices of Ki-67 and BrdUrd in human malignant tumors; Cancer; 1988; 62 (5):989-93.
12. Fasching P.A., Heusinger K., Haeberle L., Niklos M., Hein A., Bayer Ch.M., et al.; Ki67, chemotherapy response, and prognosis in breast cancer patients receiving neoadjuvant treatment; BMC Cancer; 2011; 11: 486-96.
13. Yerushalmi R., Woods R., Ravdin P.M., Hayes M.M., Gelmon K.A.; Ki 67 in breast cancer: prognostic and predictive potential; Lancet Oncol; 2010; 11:174–183.
14. Penault-Llorca F., Cayre A., Mishellany F.B., Amat S., Feillel V., Bouedec G. Le, et al.; Induction chemotherapy for breast carcinoma: predictive markers and relation with outcome; Int. J. Oncol; 2003; 22 (6): 1319-25.
15. Шамшурина Е.О., Могиленских А.С., Гребенюк Е.В. с соавт.; Сравнение фенотипов клеток адгезивной и неадгезивной культур карциномы молочной железы; Уральский медицинский журнал; 2022;2(6): 89-94.
16. Christiansen J.J., Rajasekaran A.K. Reassessing epithelial to mesenchymal transition as a prerequisite for carcinoma invasion and metastasis; Cancer Res.; 2006; 66: 8319–8326.
17. Сазонов С.В., Бриллиант А.А., Бриллиант Ю.М.; Связь состояния пролиферативных процессов и особенностей рецепторного аппарата опухолевых клеток карциномы молочной железы; Гены и клетки; 2017; 12 (4): 76-81.
18. Cidado J., Wong H.Y., Rosen D.M., Cimino-Mathews A., Garay J.P., Fessler A.G. et al.; Ki-67 is required for maintenance of cancer stem cells but not cell proliferation; Oncotarget; 2016; 7 (5): 6281-93.
Авторы
Гребенюк Екатерина Владимировна
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования Уральский государственный медицинский университет
Аспирант 3-го года обучения, специальность 3.3.3. — Патологическая физиология
ev.grebenyuk9@yandex.ru
Екатеринбург, Российская Федерация
Могиленских Анна Сергеевна
ГАУЗ СО «Центр специализированных видов медицинской помощи «Институт медицинских клеточных технологий»
Научный сотрудник
annasajler@yandex.ru
Екатеринбург, Российская Федерация
Сазонов Сергей Владимирович
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования Уральский государственный медицинский университет
Доктор медицинских наук, профессор
Заведующий кафедрой гистологии
ГАУЗ СО «Центр специализированных видов медицинской помощи «Институт медицинских клеточных технологий»
Заместитель главного врача по науке
prof-ssazonov@yandex.ru
Екатеринбург, Российская Федерация