ОПЫТ ПОЛУЧЕНИЯ КЛЕТОЧНОЙ КУЛЬТУРЫ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ИЗ ОПУХОЛИ ЛЮМИНАЛЬНОГО В ПОДТИПА

А.С. Могиленских¹,², Е.В. Гребенюк¹,², С.В. Сазонов¹,²,
Е.О. Шамшурина¹, К.В. Конышев¹,², С.М. Демидов¹,²

DOI: 10.22138/2500-0918-2022-19-1-4-13
УДК:616-006.699

¹ ФГБОУ ВО «Уральский государственный университет», г. Екатеринбург, Российская Федерация;
² ГАУЗ СО «Институт медицинских клеточных технологий», г. Екатеринбург, Российская Федерация

Резюме. В работе описан случай получения первичной культуры карциномы молочной железы из клеток опухоли люминального B подтипа, HER-2-негативного. Цель исследования. Оценить морфологию клеток и изменения в рецепторном аппарате при получении первичной клеточной культуры и дальнейшем поддержании ее в ходе пяти пассажей. Методы. В работе описан случай получения первичной культуры РМЖ. Был определен уровень экспрессии к следующим маркерам: панцитокератину, виментину, уровню пролиферативной активности Ki-67. Результаты. Приведены данные о полиформизме клеток в культуре, выделено четыре группы клеток: небольшие округлой формы (6-8 мкм), треугольные клетки, веретеновидные клетки (размерами 10-15 мкм), крупные клетки (около 20-30 мкм). Наши результаты показали, что в полученной клеточной культуре при пересевах присутствуют как клетки эпителиального фенотипа, так и мезенхимального фенотипа. Уровень пролиферативной активности Ki-67 и наличие клеток с высоким уровнем виментина, показывает возможность эпителиально-мезенхимального перехода. Заключение. Это свидетельствует о необходимости контроля количества фибробластоподобных клеток при пересевах первичной культуры для создания в дальнейшем релевантной модели при исследованиях рака молочной железы.

Ключевые слова: первичная клеточная культура, карцинома молочной железы, молекулярно-биологические подтипы карциномы молочной железы

Конфликт интересов отсутствует.
Контактная информация автора, ответственного за переписку:
Сазонов Сергей Владимирович
prof-ssazonov@yandex.ru
Дата поступления 17.02.2022 г.
Образец цитирования:
Могиленских А.С., Гребенюк Е.В., Сазонов С.В., Шамшурина Е.О., Конышев К.В., Демидов С.М. Опыт получения клеточной культуры рака молочной железы из опухоли люминального В подтипа. [Электронный ресурс] Вестник уральской медицинской академической науки. 2022, Том 19, №1, с. 4–13, DOI: 10.22138/2500-0918-2022-19-1-4-13

ЛИТЕРАТУРА:
1. Gey G.O., Coffman W.D., Kubicek M.T. Tissue culture studies of the proliferative capacity of cervical carcinoma and normal epithelium. Cancer Res. 1952; 12: 264-65.
2. Ali R., Samman N., Al Zahrani H., Nehdi A., Rahman S., Khan A.L. et al. Isolation and characterization of a new naturally immortalized human breast carcinoma cell line, KAIMRC1. BMC Cancer. 2017; 17(1):803. DOI: 10.1186/s12885-017-3812-5.
3. Gillet J.P., Wang J., Calcagno A.M., Green L.J., Varma S., Bunkholt Elstrand M., et al. Clinical relevance of multidrug resistance gene expression in ovarian serous carcinoma effusions. Mol Pharm. 2011; 8(6): 2080- 88. 
4. Nik-Zainal S., Davies H., Staaf J., Ramakrishna M., Glodzik D., Zou X., et al. Landscape of somatic mutations in 560 breast cancer whole-genome sequences. Nature. 2016; 534(7605): 47-54.
5. Minafra L., Norata R., Bravatà V., Viola M., Lupo C., et al. Unmasking epithelial-mesenchymal transition in a breast cancer primary culture: a study report. BMC Res Notes. 2012; 5: 343.
6. Сазонов С.В., Бриллиант А.А., Фадеев Ф.А., Демидов С.М.. Первый опыт культивирования клеток рака молочной железы, Вестник Уральской медицинской академической науки. 2018; 15(6): 860-7.
7. Drews-Elger K., Brinkman J.A., Miller P., Shah S.H., Harrell J.C., da Silva T.G., et al. Primary breast tumor-derived cellular models: characterization of tumorigenic, metastatic, and cancer-associated fibroblasts in dissociated tumor (DT) cultures. Breast Cancer Res. Treat. 2014; 144(3): 503-17.
8. Сазонов С.В. Обеспечение качества молекулярно-биологических исследования при диагностике рака молочной железы. Екатеринбург, Россия: ВУМАН; 2018.
9. Perou C.M., Sorlie T., Eisen M.B., van de Rijn M., Jeffrey S.S., Rees C.A., et al. Molecular portraits of human breast tumours. Nature. 2000; 406(6797): 747-52..
10. Allred D.C., Harvey J.M., Berardo M., Clark G.M.. Prognostic and predictive factors in breast cancer by immunohistochemical analysis. Mod Pathol. 1998 ;11(2):155- 68. 
11. Богуши Т.А., Калюжный С.А., Четыркина М.Р., Ястребова М.А., Щербаков А.М., Мамичев И.А., и др. Экспрессия виментина в культурах клеток эпителиальных опухолей человека. Успехи молекулярной онкологии. 2018; 5(2):24-30.
12. Nishikata T., Ishikawa M., Matsuyama T. Takamatsu K, Fukuhara T, Konishi Y. Primary culture of breast cancer: a model system for epithelial-mesenchymal transition and cancer stem cells. Anticancer Res. 2013; 33(7): 2867-73.
13. Сазонов С.В., Конышев К.В., Казанцева Н.В., Токарева М.В., Бриллиант Ю.М. Гистологические и иммуногистохимические проявления эпителио-мезенхимального перехода при тройном негативном раке молочной железы. Вестник Уральской медицинской академической науки. 2016; 2(57): 53-63
14. Brilliant A.A., Brillant Yu.M., Sazonov S.V. Characteristics of the relation between epithelial-mesenchymal transition and proliferative activity in breast carcinomas. European Journal of Cancer. 2013; 49 (2):216.
15. Ye X., Weinberg R.A.. Epithelial-Mesenchymal Plasticity: A Central Regulator of Cancer Progression. Trends Cell Biol. 2015 Nov; 25(11): 675-86. DOI: 10.1016/j.tcb.2015.07.012
16. Сазонов С.В., Бриллиант А.А., Бриллиант Ю.М. Связь состояния пролиферативных процессов и особенностей рецепторного аппарата опухолевых клеток карциномы молочной железы. Гены и Клетки. 2017; 12(4):7 6-81.
17. Bläuer M., Heinonen P.K., Rovio P., Ylikomi T.. Effects of tamoxifen and raloxifene on normal human endometrial cells in an organotypic in vitro model. Eur J Pharmacol. ;592 (1-3):13-18. DOI: 10.1016/j.ejphar.2008.06.091.
18. Нуштаева А.А. Культуры онкотрансформированных клеток молочной железы и эндометрия для изучения опухолевой прогрессии и разработки терапевтических подходов: дисс.. Новосибирск: Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН; 2019

Авторы
Могиленских Анна Сергеевна
ФГБОУ ВО Уральский государственный медицинский университет
Аспирант 3 года обучения, специальность «Патологическая физиология»
Российская Федерация, 620028, г. Екатеринбург, ул. Репина, 3 
ГАУЗ СО «Институт медицинских клеточных технологий»
Научный сотрудник
Российская Федерация, 620026, г. Екатеринбург, ул. Карла Маркса,22
annasajler@yandex.ru

Гребенюк Екатерина Владимировна
Уральский государственный медицинский университет
Российская Федерация, 620028, г. Екатеринбург, ул. Репина, 3 
Аспирант 2-го года обучения, специальность «Патологическая физиология» ФГБОУ ВО ГАУЗ СО «Институт медицинских клеточных технологий»
Российская Федерация, 620026, г. Екатеринбург, ул. Карла Маркса, 22
Научный сотрудник
ev.grebenyuk9@yandex.r u

Сазонов Сергей Владимирович
Уральский государственный медицинский университет
Российская Федерация, 620028, г. Екатеринбург, ул. Репина, 3 
Заведующий кафедрой гистологии УГМУ
ГАУЗ СО «Институт медицинских клеточных технологий»
Российская Федерация, 620026, г. Екатеринбург, ул. Карла Маркса, 22
Заместитель главного врача по науке ИМКТ
Доктор медицинских наук, профессор
prof-ssazonov@yandex.ru

Шамшурина Елена Олеговна
Уральский государственный медицинский университет
Российская Федерация, 620028, г. Екатеринбург, ул. Репина, 3 
Доцент кафедры гистологии, цитологии и эмбриологии УГМУ, кандидат медицинских наук
elshamshurina@gmail.com

Конышев Константин Вячеславович
Уральский государственный медицинский университет
Российская Федерация, 620028, г. Екатеринбург, ул. Репина, 3 
Доцент кафедры гистологии, цитологии и эмбриологии УГМУ
ГАУЗ СО «Институт медицинских клеточных технологий»
Российская Федерация, 620026, г. Екатеринбург, ул. Карла Маркса, 22
Врач-патологоанатом ГАУЗ СО «Институт медицинских клеточных технологий»
Кандидат медицинских наук, доцент
kon-konyshev@yandex.ru

Демидов Сергей Михайлович
Уральский государственный медицинский университет
Российская Федерация, 620028, г. Екатеринбург, ул. Репина, 3 
Заведующий кафедрой онкологии и лучевой диагностики УГМУ, доктор медицинских наук, профессор
professordemidov@mail.ru

Это произведение доступно по лицензии Creative Commons «Attribution-NonCommercial» («Атрибуция — Некоммерческое использование») 4.0 Всемирная.