ОЦЕНКА МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫХ ИЗМЕНЕНИЙ ПЕЧЕНИ ПОСЛЕ ЕЕ РЕЗЕКЦИИ НА ФОНЕ ВВЕДЕНИЯ МУЛЬТИПОТЕНТНЫХ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТРОМАЛЬНЫХ КЛЕТОК В УСЛОВИЯХ СТАРЕНИЯ ОРГАНИЗМА

УДК 616.36-003.93:576.54

DOI: 10.22138/2500-0918-2020-17-1-89-97

В.Ч. Вахрушева, И.Ю. Маклакова, Д.Ю. Гребнев, В.В. Базарный, И.В. Гаврилов

ФГБОУ ВО Уральский государственный медицинский университет, г. Екатеринбург, Российская Федерация;
ГАУЗ СО Институт медицинских клеточных технологий, г. Екатеринбург, Российская Федерация

Резюме. Цель исследования — изучить влияние трансплантации мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток (ММСК) на регенерацию печени в физиологических условиях и после ее резекции в условиях старения организма. Материалы и методы. Выделение культуры ММСК осуществлялось из хориона плаценты 5 лабораторных животных мышей-самок возраста 3-4 месяца, массой 22-23 г, срок гестации 18 дней. Культивирование ММСК проводилось в условиях СО2-инкубатора при температуре 37°C с содержанием углекислого газа 5% и влажностью 90%. Для трансплантации лабораторным животным были использованы ММСК третьего пассажа в дозе 4 млн клеток/кг. Введение ММСК осуществлялось в физиологических условиях (без резекции печени) и через 1 час после субтотальной резекции печени зрелым и старым лабораторным животным. Производилась оценка биохимических показателей периферической крови и морфометрических показателей печени на 1, 3, 7 сутки после введения ММСК. Результаты. Трансплантация ММСК зрелым и старым лабораторным животным без резекции печени не приводит к изменениям биохимических показателей периферической крови и морфометрических показателей печени. На 3 сутки после резекции печени на фоне введения ММСК у зрелых лабораторных животных обнаружено снижение уровня АСТ, АЛТ, щелочной фосфатазы по сравнению с контрольной подгруппой зрелых животных. У старых животных этот эффект появляется на 7 сутки. У зрелых и старых животных обнаружено повышение площади ядра гепатоцитов, ядерно-цитоплазматического индекса (ЯЦИ), количества двуядерных клеток. У зрелых лабораторных животных выявлено снижение уровня апоптоза, повышение митотической активности, что привело к увеличению количества гепатоцитов. В то же время у старых животных отмечено уменьшение апоптотического индекса, уровень митозов, количество гепатоцитов не отличалось от данных контрольной подгруппы. Заключение. Установлено, что трансплантация ММСК зрелым и старым лабораторным животным после субтотальной резекции печени стимулирует ее регенерацию. У зрелых животных выявлена активация клеточной регенерации (увеличение количества гепатоцитов) и внутриклеточной (повышение количества двуядерных клеток, ЯЦИ), тогда как у старых — лишь за счет активации внутриклеточной регенерации.

Ключевые слова: мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки, регенерация печени, биохимические показатели, морфометрические показатели

Дата поступления 10.12.2020 г.

Образец цитирования: Вахрушева В.Ч., Маклакова И.Ю., Гребнев Д.Ю., Базарный В.В., Гаврилов И.В. Оценка морфофункциональных изменений печени после ее резекции на фоне введения мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток в условиях старения организма. Вестник уральской медицинской академической науки. 2020, Том 17, №1, с. 89–97, DOI: 10.22138/2500-0918-2020-17-1-89-97

ЛИТЕРАТУРА
1. Michalopoulos G.K. Liver regeneration. J. Cell Physiol. – 2007. – V. 213, № 2. – P. 286–300.
2. Shinichiro O., Shinichi M. Potentials of Regenerative Medicine for Liver Disease. Surg. Today. – 2009. – Vol.39. P.1019–1025.
3. Timchenko N.A. Aging and liver regeneration. Trends in Endocrinology & Metabolism. –2009. –№4, Vol.20. – P. 171–176.
4. Сазонов С.В. Т-лимфоциты регуляторы активности пролиферации клеток в ткани (научный обзор). Вестник Уральской медицинской академической науки. 2007. № 1. С. 91-94.
5. Маклакова И.Ю., Гребнев Д.Ю., Ястребов А.П. Влияние экстремальных факторов на хоуминг мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток. Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 2015. Т. 59. № 4. С. 82-86.
6. Wu XB, Tao R. Hepatocyte differentiation of mesenchymal stem cells. Hepatobiliary Pancreat Dis Int 2012; 11: 360-371 [PMID:22893462 DOI: 10.1016/S1499-3872(12)60193-3].
7. Ikebe C., Suzuki K. Mesenchymal Stem Cells for Regenerative Therapy: Optimization of Cell Preparation Protocols. Biomed Research International. 2014. P.951512.
8. Sun L., Fan X., Zhang L. et. al. Bone mesenchymal stem cell transplantation via four routes for the treatment of acute liver failure in rats. International journal of molecular medicine. — 2014. — 34. — 987-96.
9. Prockop D.J., Oh J.Y Mesenchymal stem/stromal cells (MSCs): role as guardians of inflammation. Mol. Ther. – 2012. – Vol. 20(1) – pp. 14-20.
10. Wang Y, Chen X, Cao W, Shi Y. Plasticity of mesenchymal stem cells in immunomodulation: pathological and therapeutic implications. Nat Immunol 2014. Vol. 15. P. 1009 –1016.
11. Mitchell C., Willenbring H. A reproducible and well-tolerated method for 2/3 partial hepatectomy in mice. Nature protocols. Vol.3. №7.2008. P. 1167-1171. doi: 10.1038/nprot.2014.122.

Авторы
Вахрушева Виктория Чаукатовна
ФГБОУ ВО Уральский государственный медицинский университет
Aспирант кафедры патологической физиологии
Российская Федерация, 620028 г. Екатеринбург, ул. Репина 3 
yusupova1@inbox.ru

Маклакова Ирина Юрьевна
ФГБОУ ВО Уральский государственный медицинский университет
Кандидат медицинских наук, доцент кафедры патологической физиологии
Российская Федерация, 620028 г. Екатеринбург, ул. Репина 3 
ГАУЗ СО «Институт медицинских клеточных технологий»
Старший научный сотрудник
Российская Федерация, 620026 г. Екатеринбург, ул. Карла Маркса 22а
makliu@mail.ru

Гребнев Дмитрий Юрьевич
ФГБОУ ВО Уральский государственный медицинский университет
Доктор медицинских наук, заведующий кафедрой патологической физиологии
Российская Федерация, 620028 г. Екатеринбург, ул. Репина 3 
ГАУЗ СО «Институт медицинских клеточных технологий»
Старший научный сотрудник
Российская Федерация, 620026 г. Екатеринбург, ул. Карла Маркса 22а
dr-grebnev77@mail.ru

Базарный Владимир Викторович
ФГБОУ ВО Уральский государственный медицинский университет
Доктор медицинских наук, профессор кафедры клинической лабораторной диагностики и бактериологии
Российская Федерация, 620028 г. Екатеринбург, ул. Репина 3 
vlad-bazarny@yandex.ru

Гаврилов Илья Валерьевич
ФГБОУ ВО Уральский государственный медицинский университет
Кандидат биологических наук. доцент кафедры биохимии
Российская Федерация, 620028 г. Екатеринбург, ул. Репина 3 
ГАУЗ СО «Институт медицинских клеточных технологий»
Старший научный сотрудник
Российская Федерация, 620026 г. Екатеринбург, ул. Карла Маркса 22а
given18@yandex.ru