Изменение процессов пролиферации и апоптоза фибробластов при образовании спаек в брюшной полости

С.В. Скальский, Т.Ф. Соколова

УДК: 616-002.18-006.327:616.381-007.274-092.9
DOI: 10.22138/2500-0918-2017-14-4-369-374

Омский государственный медицинский университет, г. Омск, Российская Федерация

Резюме. Цель исследования — оценка процессов пролиферации, коллагеногенеза и апоптоза фибробластов крыс, активированных in vivo при моделирования гемоперитонеума. Материал и методы. Исследования проведены в первичной культуре клеток на 114 пулах перитонеальных фибробластов крыс, полученных от 26 животных с гемоперитонеумом на 10 сутки после его моделирования – основная группа, и 12 контрольных крыс. Суспензию перитонеальных фибробластов (2×106 кл./мл) культивировали 24 часа (t 37°С, 5% СО2). Пролиферативную активность оценивали по количеству фибробластов с морфологическими признаками митозов, а также по экспрессии маркера пролиферации Ki-67 с использованием моноклональных антител. Степень стимуляции коллагеногенеза фибробластами оценивали по количеству белковосвязанного оксипролина в супернатантах клеточных культур. Количество активных форм ядерного транскрипционного фактора NF-kB определяли методом иммуноферментного анализа. Проводили ревизию брюшной полости крыс с макро- и микроскопическим анализом спаек. Результаты. Установлено, что у крыс с гемоперитонеумом пролиферативная активность фибробластов была высокой: митотический индекс превышал показатели контроля более чем в 5 раз, уровень маркера пролиферации Ki-67 был повышен почти в 8 раз. Выявлено 4-кратное увеличение коллагенсинтетической функции активированных фибробластов. Отмечена прямая корреляционная связь между пролиферативной активностью фибробластов, количеством белковосвязанного оксипролина и числом спаек в брюшной полости крыс (r=0,91; r=0,78, р<0,05). Усиление процессов пролиферации фибробластов, их коллагенсинтетической функции при индукции спаечного процесса в брюшной полости сопровождалось активацией фактора транскрипции NF-κB, приводящей к блокированию процессов апоптоза. Показатели активации NF-κB перитонеальных фибробластов крыс с гемоперитонеумом в 8 раз превышали значения контрольных. Выводы: Нарушения ауторегуляции роста соединительной ткани при гемоперитонеуме с преобладанием индукции пролиферации фибробластов, сопровождающейся активацией их коллагенсинтетической функции над ингибицией приводит к прогрессированию спайкообразования.

Ключевые слова: спайкообразование, пролиферация, оксипролин, апоптоз, маркер пролиферации Ki-67, ядерный транскрипционный фактор NF-Κb

Дата поступления 08.09. 2017

Образец цитирования:
Скальский С.В., Соколова Т.Ф. Изменение процессов пролиферации и апоптоза фибробластов при образовании спаек в брюшной полости. Вестник уральской медицинской академической науки. 2017, Том 14, №4, с. 369–374, DOI: 10.22138/2500-0918-2017-14-4-369-374

ЛИТЕРАТУРА
1. Klingberg F., Hinz B., White E. S. The myofibroblast matrix: implications for tissue repair and fibrosis. The Journal of pathology. 2013. Vol. 229 (2). pp. 298-309.
2. Lieber R. L., Ward S. R. Cellular mechanisms of tissue fibrosis. 4. Structural and functional consequences of skeletal muscle fibrosis. American Journal of Physiology-Cell Physiology. 2013. Vol. 305 (3). pp. 241-252.
3. Головач И.Ю. Ядерный фактор κB (NF-κB) как важный патогенетический фактор и новая мишень в лечении ревматических заболеваний. Рациональная фармакотерапия. 2012. Т. 3 (24). С. 46-51.
4. Duffield J. S. et al. Host responses in tissue repair and fibrosis. Annual review of pathology. 2013. Vol.8. p. 241.
5. Mukhopadhyay S. et al. Autophagy and apoptosis: where do they meet? Apoptosis. – 2014. Vol. 19 (4). pp. 555-566.
6. Arya A. K. et al. Recent advances on the association of apoptosis in chronic non healing diabetic wound. World J Diabetes. 2014. Vol. 5 (6). pp. 756-762.
7. Ikeda K. et al. Resveratrol inhibits fibrogenesis and induces apoptosis in keloid fibroblasts. Wound Repair and Regeneration. 2013. Vol. 21 (4). pp. 616-623.
8. Кунцевич Н.В. Роль нуклеарного фактора транскрипции NF-κB в развитии отторжения трансплантата. Вестник трансплантологии и искусственных органов. 2010. Т.XII, № 1. С.72-77.
9. Lee Y. S. Hsu T., Chiu W.C. et al. Keloid-derived, plasma/fibrin-based skin equivalents generate de novo dermal and epidermal pathology of keloid fibrosis in a mouse model. Wound Repair and Regeneration. 2015. Vol. 24(1). pp.57-60.
10. Шараев П.Н. Метод определения свободного и связанного оксипролина в сыворотке крови. Лабораторное дело. 1990. № 5. С. 283-285.
11. Czabotar P. E. et al. Control of apoptosis by the BCL-2 protein family: implications for physiology and therapy. Nature reviews Molecular cell biology. 2014. Vol. 15(1). pp. 49-63.
12. Forbes S. J., Rosenthal N. Preparing the ground for tissue regeneration: from mechanism to therapy. Nature medicine. 2014. Vol. 20(8). pp. 857-869.

Авторы
Скальский Сергей Викторович
К.м.н., доцент, заведующий кафедрой фармакологии с курсом клинической фармакологии
sergscalskiy@mail.ru

Соколова Татьяна Федоровна
Д.м.н., ассистент кафедры фармакологии с курсом клинической фармакологии
tfsokolova@mail.ru.
Омский государственный медицинский университет
Российская Федерация,. 644099, г. Омск, ул. Ленина д.12.

 

 
 
 

Авторизация