ГАЗОЖИДКОСТНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ И ТРАДИЦИОННЫЕ МЕТОДЫ ИЗУЧЕНИЯ КИШЕЧНОЙ МИКРОБИОТЫ У ДЕТЕЙ ПЕРВОГО ГОДА ЖИЗНИ
DOI: 10.22138/2500-0918-2018-15-5-733-743
УДК 616.345-093
Л.Г. Боронина, Г.В. Федотова, Е.В. Саматова, И.В. Вахлова
Уральский государственный медицинский университет, г. Екатеринбург, Российская Федерация;
Областная детская клиническая больница, г. Екатеринбург, Российская Федерация
Резюме. Цель исследования — оценить возможность использования и диагностическую значимость культурального исследования кала и метода газожидкостной хроматографии по обнаружению короткоцепочечных жирных кислот в фекалиях при изучении микробиоты кишечника у детей первого года жизни. Материалы и методы. Проведено параллельное культуральное исследование и определение короткоцепочечных жирных кислот методом газожидкостной хроматографии в кале у детей до года: условно-здоровых (n=121) и перенесших резекцию кишечника (n=47). Результаты. У условно-здоровых детей уровень уксусной кислоты, отражающий активность аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов, ниже, чем у детей с резекцией кишечника. И наоборот уровень пропионовой и масляной кислот, показывающие активность анаэробов, выше. Анаэробный индекс у условно-здоровых детей несколько более смещен в отрицательные значения, что также свидетельствует о большей активности анаэробных микроорганизмов. Данное наблюдение подтверждается культурально. У детей, перенесших резекцию кишечника, по сравнению с условно-здоровыми, более высокие уровни факультативно-анаэробной условно-патогенной флоры, в частности группы Enterobacteriaceae (E. coli лактозонегативная и гемолитическая; Klebsiella spp., Enterobacter spp., Citrobacter spp.) и группы Morganellaceae (Proteus spp.), а также Staphylococcus aureus, при меньшем содержании анаэробов. Заключение. Сочетание культурального исследования, для исключения инфекционной патологии, и изучение метаболической активности микроорганизмов, основанной на определении короткоцепочечных жирных кислот методом газожидкостного хроматографического анализа, позволит дать комплексное лабораторное заключение о состоянии микробиоты кишечника у детей до года.
Ключевые слова: кишечная микробиота, дети, культуральное исследование, короткоцепочечные жирные кислоты, резекция кишечника
Конфликт интересов отсутствует.
Контактная информация автора, ответственного за переписку:
Саматова Елена Валерьевна
lavrinenko@eka-net.ru
Дата поступления 09.10.2018
Образец цитирования:
Боронина Л.Г., Федотова Г.В., Саматова Е.В., Вахлова И.В. Газожидкостная хроматография и традиционные методы изучения кишечной микробиоты у детей первого года жизни. Вестник уральской медицинской академической науки. 2018, Том 15, №5, с. 733–743, DOI: 10.22138/2500-0918-2018-15-5-733-743
ЛИТЕРАТУРА
1. Печкуров Д.В., Турти Т.В., Беляева И.А., Тяжева А.А. Микробиота кишечника у детей: от профилактики нарушений становления к предупреждению неинфекционных заболеваний. Педиатрическая фармакология. 2016; 13(4): 377-383.
2. Kelly D., Mulder E. Microbiome and immunological interaction. Nutrition Rev. 2012 Aug; 70 (Suppl.1): 518-530. PMID: 22861803 DOI: 10.111/j1753-4887.2012.00498.x
3. Sudo N., Sawamura S., Tanaka K., Aiba Y., Kubo C., Koqa Y. The requirement of intestinal bacterial flora for the development of an IgE production system fully susceptible to oral tolerance induction. J. Immunol. 1997 Aug; 159: 1739-1745. PMID: 9257835
4. Cani P.D., Neyrinck A.M., Fava F., Knauf C., Burcelin R.G., Tuohy K.M., et al. Selective increases of bifidobacteria in gut microflora improve high-fat-diet-induced diabetes in mice through a mechanism associated with endotoxemia. Diabetologia. 2007 Nov; 50(11): 2374-2383. PMID: 17823788 DOI: 10.1007/s00125-007-0791-0
5. Алешкин В.А., Селькова Е.П., Затевалов А.М., Миронов А.Ю., Волчецкий А.Л., Гудова Н.В. Определение дисбиотических изменений желудочно-кишечного тракта по маркерам содержимого кишечника. Федеральные клинические рекомендации. Н. Новгород: Изд-во «Ремедиум Приволжье», 2016.
6. Макарова С.Г., Намазова-Баранова Л.С. Кишечная микробиота и использование пробиотиков в практике педиатра. Что нового? Педиатрическая фармакология. 2015; 12(1): 38-45.
7. Hood L., Heath J.R., Phelps M.E., Lin B. Systems biology and new technologies enable predictive and preventative medicine. Science. 2004 Oct; 306(5696): 640–643. PMID: 15499008 DOI: 10.1126/science.1104635
8. Захарова И.Н, Дмитриева Ю.А. Кишечная микробиота и применение пробиотиков с позиции доказательной медицины. Consilium Medicum. Педиатрия (Прил.). 2016; 4: 24–28.
9. Azad M.B., Konya T., Maughan H., Guttman D.S., Field C.J., Chari R.S., et al. Gut microbiota of healthy Canadian infants: profiles by mode of delivery and infant diet at 4 months. Can. Med. Ass. Journal. 2013; 51 (3): 385-394. PMID: 23401405
10. Klessen B., Bunke H., Tovar K., Sawatzki G. Influence of two infant formulas and human milk on the development of the fecal flora in newborninfants. Acta Paediatrica. 1996 Jan; 84(12): 1347-1356. DOI: 10.1111/j.1651-2227.1995.tb13567.x
11. Родригеc Х.М. Микробиота женского молока. Consilium Medicum. Педиатрия (Прил.). 2016; 4: 35–40.
12. Минушкин О.Н., Ардатская М.Д. Диагностика состояния микрофлоры кишечника и дифференцированная коррекция ее нарушений. Пособие для врачей. Москва; 2005.
13. Ардатская М.Д., Бельмер С.В., Добрица В.П., Захаренко С.М., Лазебник Л.Б., Минушкин О.Н., и др. Дисбиоз (дисбактериоз) кишечника: современное состояние проблемы, комплексная диагностика и лечебная коррекция. Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. Выпуск 117. 2015; 5: 13-50.
14. Пат. 2220755 Российская Федерация «Способ разделения смеси жирных кислот фракции C2-C6 методом газожидкостной хроматографии». М.Д. Ардатская, Н.С. Иконников, О.Н. Минушкин; заявитель и патентообладатель Учебно-Научный центр Медицинского центра Управления делами Президента РФ. № 2002119447; заявл. 23.07.02; опубл. 10.01.04.
15. Ардатская М.Д. Клиническое значение короткоцепочечных жирных кислот при патологии желудочно-кишечного тракта. Автореферат дис. докт. мед. наук. Москва; 2003.
16. Сугян Н.Г. Клиническое значение короткоцепочечных жирных кислот при функциональных нарушениях желудочно-кишечного тракта у детей раннего возраста. Автореф. дис. кан. мед. наук. Москва; 2010.
17. Носкова О.Ю., Григорович М.С., Ардатская М.Д. Функциональная активность микробиоты кишечника у детей раннего возраста в зависимости от свойств кисломолочного прикорма. Медицинский альманах. 2015; 2(37): 102-106.
18. Техника сбора и транспортирования биоматериалов в микробиологические лаборатории. Методические указания 4.2.2039-05. Федеральный центр Госсанэпиднадзора Минздрава России. Москва; 2005.
19. Бактериологическая диагностика дисбактериоза кишечника. Методические рекомендации Министерства здравоохранения РСФСР. Москва; 1977.
20. Об утверждении отраслевого стандарта 91500.11.0004-2003 «Протокол ведения больных. Дисбактериоз кишечника». Приказ Министерства здравоохранения Рос. Федерации от 09.06.2003 №231. Москва; 2003.
21. Биргер М.О., ред. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования. М.: Медицина; 1973.
22. Минушкин О.Н., Ардатская М.Д., Иконников Н.С. Способ определения короткоцепочечных жирных кислот (фракции С2-С6 с изомерами) в различных биологических субстратах методом газожидкостной хроматографии: метод. рекомендации для врачей, руководителей органов управления здравоохранением и ЛПУ. Российская медицинская академия последипломного образования. Москва; 2005.
Авторы
Боронина Любовь Григорьевна
Уральский государственный медицинский университет
Д.м.н., профессор кафедры клинической лабораторной диагностики и бактериологии
Российская Федерация, 620028 г. Екатеринбург, ул. Репина, 3
boroninalg@mail.ru
Федотова Галина Викторовна
Уральский государственный медицинский университет
Аспирант кафедры госпитальной педиатрии
Российская Федерация, 620028 г. Екатеринбург, ул. Репина, 3
tichcovagala@yandex.ru
Саматова Елена Валерьевна
Областная детская клиническая больница
К.м.н., врач-бактериолог лаборатории клинической микробиологии
Российская Федерация, 620149 г. Екатеринбург, ул. Серафимы Дерябиной, 32
lavrinenko@eka-net.ru
Вахлова Ирина Вениаминовна
Уральский государственный медицинский университет
Д.м.н., профессор, заведующая кафедрой госпитальной педиатрии
Российская Федерация, 620028 г. Екатеринбург, ул. Репина, 3
vachlova-61@mail.ru